CAS:86088-83-7|FIBRONECTIN

Produktetikett

Fibronektin: Laminin: Extrazelluläre Matrix, ECM: Zellspreizung: Gelatine: CAS-NR.: 86088-83-7

Produktbeschreibung

Fibronektin (FN), auch bekannt als Fibronektin, ist ein natürlicher Zelladhäsionsfaktor mit breitem Wirkungsspektrum. Fibronektin ist ein 440-500KDa-dimeres Glykoprotein, das aus zwei ähnlichen 220-250KDa-Untereinheiten besteht, die durch Disulfidbrücken verbunden sind. Es kommt hauptsächlich in zwei Formen vor: der löslichen und der unlöslichen Form. Ersteres liegt im Plasma als Dimer vor, und letzteres liegt in der extrazellulären Matrix (ECM) und der Zelloberfläche als Multimer vor. Die Hauptfunktion von Fibronektin hängt mit der Zelladhäsion an der extrazellulären Matrix zusammen. Die Sequenz Arg-Gly-ASpSer (RGDS) auf Fibronektin erkennt zellassoziierte Transmembran-Integrinrezeptoren, um die Adhäsion zu regulieren. An diesem Adhäsionsprozess sind auch andere Domänen von Fibronektin beteiligt, möglicherweise mit Wechselwirkungen mit Kollagen, Heparin und anderen Glykosaminoglykanen auf der Zelloberfläche. Die Konformation und Ausrichtung von Fibronektin nach der Adhäsion sind ebenfalls wichtig und spielen eine Rolle bei der Zellverteilung und der Adhäsionsstärke der Endothelzellen. Mit Fibronektin beschichtete Kulturgefäße, die zur Kultivierung von BHK, CHO und anderen Zelllinien verwendet werden, weisen deutlichere Adhäsionseffekte auf. Man kann sagen, dass Fibronektin an vielen physiologischen Prozessen im Körper beteiligt ist, wie etwa der Zell-Zell-Adhäsion und -Migration, dem Aufbau des Zytoskeletts, der Tyrosinphosphorylierung und der Tumormetastasierung.

Bei diesem Produkt handelt es sich um aus menschlichem Plasma gewonnenes Fibronektin, das durch Affinitätschromatographie gereinigt wurde. Es liegt in Form eines lyophilisierten Pulvers vor und eignet sich zur Zelladhäsion und Zellausbreitung.

Produktmerkmale

1)CAS-NR.:86088-83-7
2) Synonyme: Fibronektin aus menschlichem Plasma; Menschliches Plasma-Fibronektin; Natürliches menschliches Fibronektin; Menschliches Filbronektin; Fibronektin aus menschlichem Plasma; Natürliches menschliches Fibronektin von: Menschliches Fibronektin von;
3) Molekulargewicht: 440 kDa (nicht reduzierte Form)
4) Aussehen: weißes Pulver
5) Zusammensetzung: 100 mM CAPS, 0,15 M NaCl, 1 mM CaCl2, pH 11,0
6) Qualitätskontrolle: 1) 4-12 % SDS-PAGE-Gelelektrophorese und Coomassie-Brillantblau-Färbung zur Überprüfung des Proteins. Unter reduzierenden Bedingungen beträgt die Reinheit 290 %: 2) Zelladhäsionstest zeigt, dass Fibronektin die Adhäsion und Ausbreitung von BHK-21-Zellen extrem fördern kann; 3) Fibronektin wurde negativ auf Bakterien, Pilze und Mykoplasmen getestet.

Lagerungs- und Transportmethoden

Lagerung: Bei 2-8 Grad lagern, mindestens 1 Jahr gültig. Nicht einfrieren.
Versand: Eisbeutelversand.

Produktauflösung und Verwendung

Nehmen Sie das Produkt aus dem Kühlschrank und lassen Sie es mindestens 20 Minuten lang bei Raumtemperatur stehen. Geben Sie eine angemessene Menge Chongxian-Pulver in einer Konzentration von 1 mg/ml in steriles destilliertes Wasser und lassen Sie es 30 Minuten lang ruhen, damit das Pulver nicht vollständig in die Lösung gelangt. Nicht vibrieren oder wirbeln. Wenn nicht die gesamte Lösung sofort verwendet werden kann, teilen Sie sie bitte entsprechend der Einzeldosis auf und frieren Sie sie bei -20 Grad ein. Es wird empfohlen, das auflösende Produkt innerhalb von 2 Wochen zu verwenden. Nicht im frostfreien Kühlschrank lagern und wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden.

Anwendungen

Die empfohlene Konzentration für die Verwendung als Zellkultur-Beschichtungsmatrix beträgt 1-5ug/cm2, oder als Medienzusatz beträgt die empfohlene Konzentration 5ug/ml.

Beschichtungsschritte

Die folgenden Schritte dienen als Referenz zur Bestimmung der optimalen Beschichtungskonzentration basierend auf dem spezifischen Kultursystem.

1) Verwenden Sie serumfreies, Ca2+-, Mg2+--freies Kulturmedium oder Puffermedium, um die Fibronektin-Stammlösung auf die erforderliche Arbeitskonzentration zu verdünnen, und verwenden Sie das Mindestvolumen, um die Kulturoberfläche vollständig zu bedecken. Die empfohlene Beschichtungskonzentration beträgt 1-5ug/cm2. Wenn die endgültige Beschichtungskonzentration beispielsweise 5 ug/cm2 beträgt, verdünnen Sie die Stammlösung auf 50 ug/ml und geben Sie die Menge entsprechend 1 ml/35 mm Petrischale, 3 ml/60 mm Petrischale usw. hinzu.

[Hinweis]: Da die Fibronektinlösung CAPS enthält, kann die Zugabe von Medien, die Ca{{0}} und Mg2+ enthalten, zu Fibronektin zur Bildung unlöslicher Gold-Argonoxide führen. Dies tritt nicht auf, wenn das Puffersystem den pH-Wert des Verdünnungsmittels auf 8,0 oder niedriger einstellen kann.

2) Geben Sie eine angemessene Menge verdünntes Fibronektin auf die Oberfläche des Kulturgefäßes.
3) 1 Stunde lang bei warmer Temperatur inkubieren.
4) Überschüssige Fibronektinlösung absaugen.
5) Mit entionisiertem Wasser reinigen und darauf achten, die untere Schicht während des Betriebs nicht zu zerkratzen.
6) Der Kulturbehälter ist nun einsatzbereit. Es kann in feuchtem Zustand bei 2-8 Grad gelagert oder unter sterilen Bedingungen an der Luft getrocknet werden.

Vorsichtsmaßnahmen

1) Einige Inhaltsstoffe in diesem Produkt können bei unsachgemäßer Handhabung Gesundheitsrisiken verursachen.Treffen Sie daher beim Umgang mit diesem Produkt Vorsichtsmaßnahmen, einschließlich des Tragens von Kleidung und Augenschutz.
2) Zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit tragen Sie bitte einen Laborkittel und Einweghandschuhe.

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